內(nèi)臟利什曼病（VL）是一種死亡率很高的惡性疾病，主要由杜氏利什曼原蟲引起。白蛉是VL傳播的主要媒介，而狗是白蛉的主要攜帶者。VL是許多國家的一種地方性疾病，在大多發(fā)展中國家中，VL也是一個嚴重的問題，特別在那些人口集中的城市里。這種疾病在拉丁美洲、東非、中東、印度和中國都有很高的發(fā)病率。VL也會傳播到靠近地中海的一些國家去，如意大利、法國南部、西班牙、葡萄牙和非洲南部。在歐洲南部，VL已成為AIDS病人中主要的機會性傳染病。急性VL的診斷通常是通過抽吸骨髓來直接鑒別其寄生蟲。這種鑒定方法對人體有侵襲性，疼痛并且危險，而且經(jīng)常因不能從組織中分離到寄生蟲而使得鑒定的成功率非常小。另外 ELISA試劑盒，在急性疾病階段，抗利什曼原蟲抗體的滴度非常高，血清篩查的方法已廣泛被應(yīng)用。ELISA應(yīng)當是VL血清學(xué)診斷的實驗方法，盡管免疫熒光抗體檢測和直接凝集實驗檢測的是整個寄生蟲，但它們?nèi)匀槐粡V泛應(yīng)用（ELISA一起用或單獨用）。
3、 ELISA試劑盒實驗原理
在*次溫育時，病人血清中的抗體結(jié)合到檢測孔的抗原上。在第二次溫育時，酶復(fù)合物可結(jié)合到抗原抗體復(fù)合物上。洗板除去未結(jié)合的酶聯(lián)物，加入顯色劑，有酶聯(lián)物和過氧化物酶的情況下會顯示藍色。之后加入終止液終止酶反應(yīng)，此時溶液由藍色變成。
收集樣品后盡快檢測. 如需保存, 凍存樣品,但要避免反復(fù)凍融.檢測前,將樣品解凍至室溫.
如樣品需稀釋,用EIA緩沖液稀釋
建議樣品,標準品做雙份檢測
保持樣品處于中性PH范圍.有機溶劑的污染會影響實驗結(jié)果
ELISA試劑盒只能用本試劑盒提供的洗滌液洗板.不充足的洗板會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果
在吸水紙上拍干去除殘留液滴時,切勿用吸水紙刮擦孔內(nèi)壁
顯示劑應(yīng)避光保存并避免與金屬物質(zhì)接觸
加終止液后,30 min內(nèi)就應(yīng)讀取實驗結(jié)果